Cytochrome P450 Inhibition Ki assay

Features


Cytochrome P450 inhibition Ki 결정은 시험관내 실험 ADME 서비스의 포트폴리오 중 하나입니다. Cytochrome P450 inhibition Ki 를 사용하여 가역 가능한 cytochrome P450 (CYP) 억제와 관련성 및 유형을 이해할 수 있습니다.

Cytochrome P450 (CYP) inhibition Ki 의 임상적 관련성 결정

  • Cytochrome P450 (CYP)은 약물의 신진대사에 큰 역할을 하는 효소 계열입니다.
  • 화합물의 co-administration 로 인해 하나 또는 둘 다 상대방의 신진대사를 저해할 수 있으므로 특정 cytochrome P450 효소를 저해하기 위한 화합물의 잠재력 평가가 중요합니다. 이것은 체내 혈장 수치에 영향을 미칠 수 있으며 잠재적으로 약물 반응이나 독성을 악화시킬 수 있습니다.
  • 화합물의 저해 상수(Ki) 결정이란 FDA가 가역성 cytochrome P450 저해제의 임상적 관련성을 연구하기 위해 권고하는 현행 접근법입니다.
  • 저해 유형은 효소 저해 모델(즉, 경쟁적, 비경쟁적, 비경쟁적, 비경쟁적, 혼합적)에 대한 통계 적합에 의해 결정됩니다.

Assay Design


Typical Test Article Concentration

 0, 0.25 x IC50, 0.5 x IC50, 0.75 x IC50, 1 x IC50, 2.5 x IC50, 5 x IC50
(different concentrations available)

CYP isoforms

 CYP1A2, CYP2A6, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4, CYP2E1

Typical Substrate Concentrations

 Dependent on number of isoforms assessed 0.5 x Km, 1 x Km, 3 x Km , 6 x Km, 10 x Km

Number of Replicates

 3

Test Article Requirements

 Dependent on IC50

Analysis Method

 LC-MS/MS

Data Delivery

 Ki
Standard error of Ki
Identification of type of inhibition


Data


Table 1 . Rate equations for different inhibition model types
V; 속도, Vmax; 최대 속도, Km; 친화도 상수, [S]; 기질 농도, [I]; 저해제 농도, Ki; 저해 상수, α; 저해제의 결합이 기질에 대한 효소의 친화력을 변화시키는 정도를 결정하는 상호작용 파라미터

Cytochrome P450 Inhibition Ki assay_1.png



Q&A


1. 왜 cytochrome P450 inhibition을 조사하는 것이 중요한가요?

Cytochromes P450은 약물의 신진대사에 중요한 역할을 하는 효소 계열입니다. 특정 cytochrome P450 효소를 가역적으로 저해할 수 있는 화합물의 잠재력 평가는 화합물의 co-administration이 한 가지 또는 둘 다 상대방의 신진대사를 저해할 수 있기 때문에 중요합니다. 이는 체내 혈장 수치에 영향을 미칠 수 있으며, 의약품 부작용이나 독성을 유발할 수 있습니다.
화합물의 저해 상수(Ki)의 결정은 가역성 cytochrome P450 저해제의 임상적 관련성을 연구하기 위해 FDA와 EMA가 현재 권장하는 접근법입니다.


2. Cytochrome P450(CYP) Inhibition Ki assay 에 대한 개요를 알려주세요.

화합물들은 최대 6개의 저해제 농도를 배양하여 평가됩니다. 시험 약물의 Ki 값 결정은 특정 효소에 대한 화합물의 저해 친화력을 정의하며 in vitro 저해제의 잠재적인 임상적 유의성을 추정하는 데 사용될 수 있습니다.


References


1 Ogilvie BW et al. (2008) in Drug-Drug Interactions Second Edition (Ed. Rodrigues AD) Informa Healthcare USA New York 231-358
2 Wrighton SA and Ring BJ. (1994) Pharmaceutical Research 11 (6); 921-924
3 Gibbs MA et al. (1999) Drug Metab Dispos 27(2); 180-187
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5 The European Medicines Agency (EMA) Guideline on the Investigation of Drug Interactions (Adopted in 2012)