Plasma protein binding assay

Features


Plasma protein binding assay은 in vitro ADME 스크리닝 서비스 중 하나로, 시험물질, 약물의 체내 분포 가능성을 이해하기 위해 진행합니다.

  • 약물이 혈장에 결합하는 정도는 신체의 조직으로 분포하는 방식에 영향을 미칩니다.
  • 광범위한 혈장 단백질 결함은 세포 작용 부위에 접근하는데 이용가능한 화합물의 양을 제한하게 되고 대사와 배출을 지연시키게 됩니다.
  • Equilibrium dialysis는 plasma protein binding을 평가하기 위한 가장 널리 알려진 방법으로, ultrafiltration과 같은 다른 방법과 비교해 봤을 때, 비 특이적 결합에 대한 영향을 최소화 할 수 있다는 장점이 있습니다.
  • Plasma protein binding assay는 equilibrium dialysis법을 사용하여 수행되며 단백질에 결합하지 않은 화합물의 분획 (fu (%); unbound fraction) 값을 제공합니다.

Assay Design


Method

Equilibrium Dialysis

Test Article Concentration

5 μM (different concentrations available)

Species

Human, rat, mouse, dog (other species available on request)

Number of Replicates

3

Compound Requirements

100 μL of 20 mM solution

Analysis Method

LC-MS/MS

Data Delivery

fu (%) = [1 - (Ratiop – Ratiob) / Ratiop] x 100
Ratiop : analyte/Internal standard peak area ratio in plasma
Ratiob : analyte/Internal standard peak area ratio in buffer


Data


Species Compound fu (%)

Mean

SD

Human

 Compound X

 82.21

2.24

Metoprolol*

73.21

1.68

Propranolol*

13.45

0.38

Warfarin*

0.51

0.05

Rat

 Compound X

 84.41

3.45

Metoprolol*

76.66

9.76

Propranolol*

15.84

0.50

Warfarin*

0.51

0.06

                                                                                                                                                                      * positive control compound

Table 1. Human, rat 혈장에서 시험물질 및 양성대조군 물질의 혈장 단백질 비결합 분획 값 (fu (%); unbound fraction)을 제공합니다.